期刊简介
本刊创刊于1992年，是由中国科协技术协会主管，中国光学学会主办，中国人民解放军总医院承办的中国科技论文统计源期刊。在国内医学领域享有盛誉。主要栏目有论著，报道激光医学领域的基础研究和临床试验的最新研究成果；综合，回顾国内外激光医学目前最新的研究进展，此外还有短篇报道，国外期刊摘译，会讯等栏目。本刊发展了大量激光医学的基础研究和在临床各科应用研究的论文，对促进激光在医学中的应用，提高激光医学研究水平起到了积极作用，成为国内激光医学学术交流的园地，对外交流的窗口和继续教育的基地。
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首页>中国激光医学杂志
- 杂志名称：中国激光医学杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中国光学学会
- 国际刊号：1003-9430
- 国内刊号：11-2926/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中)
应用荧光探针H2DCF-DA检测光照致细胞内活性氧产生的初步研究
李晓松；刘凡光；顾瑛；王雷；戴维德；丁新民；曾晶
关键词：H2DCF-DA, 弱激光治疗, 活性氧, 线粒体, 荧光显微镜
摘要：目的应用荧光显微镜及新型荧光探针 H2DCF-DA检测在光源照射过程中人脐静脉血管内皮细胞(ECV 304)内活性氧的产生情况.方法将 ECV 304细胞接种于 35 mm培养皿中,24 h后加入 H2DCF-DA,使其终浓度为 10μmol/L,孵育 30 min.利用荧光显微镜的激发光源作为照射光源,在采集荧光图像的同时完成光源照射,光源输出波长范围为 460～490 nm,功率密度约为 100 mW/cm2.连续采集 DCF的荧光图,观察细胞内 DCF荧光的变化情况,采用计算机图像处理和分析技术,求得细胞内不同照射时间点 DCF平均荧光强度,进而得到平均荧光强度-时间曲线.另外,使用线粒体特异标记探针 MitoFluor Red 589与 H2DCF-DA共同孵育细胞,分别采集同一细胞的 DCF的荧光图和 MitoFluor Red 589的荧光图,并利用像素-荧光强度分析方法来确定 DCF荧光在细胞内的分布位置.结果在光源照射的开始阶段,ECV 304细胞内的 DCF荧光强度迅速增加,在第 10s时便上升至第 2s时的 2.2倍,但是随着照射时间逐渐延长,荧光强度增幅逐渐变小,到第 60s时上升至第 2s时的4.7倍.观察时间进一步延长,DCF的荧光强度的变化似乎进入平台期,继而开始出现下降.考察 DCF荧光在 ECV 304细胞内的分布位置主要通过比较细胞内不同区域的 I1/I2值,通过图像分析与计算得到线粒体区、细胞核区以及细胞质非线粒体区内 I1/I2值分别为 1.9490±0.2209、1.1128±0.2256、0.9413±0.0853.结论荧光探针技术和图像分析技术应用于细胞内活性氧的检测,方法简便、结果可靠.光照可致 ECV 304细胞内活性氧产生,且主要位于线粒体内,这可能与线粒体内内源性光敏物质丰富有关,但尚不能完全排除该荧光探针自身性质致使上述现象出现的可能.
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